技术路线

文库构建和测序

生物膜形成试验

各指标统计学分析

结石标本和胆汁标本

获得胆道微生态与原发性胆总管结石成因和复发的相关性结论

病例资料和基本信息收集（姓名、性别、年龄、民族、病史、症状、体征、实验室检查、影像学检查等）

生物信息学分析

数据分析

胆石成分分析

卡方检验、t检验、U检验等

标本收集

16S rDNA高通量测序技术

标本检测

LCBDE

各中心不同民族非胆总管结石对照病例确认（n=40例）

Alpha多样性分析、稀释曲线分析、Beta多样性分析等

代谢产物检测

病例收集

多条件培养

胆石因子检测

病原菌鉴定

ERCP取石

胆道菌群分布特征

胆道菌群多样性比较

EST

各中心不同民族原发性胆总管结石复发病例确认（n=30例）

结论

DNA提取

PCR扩增

各中心不同民族原发性胆总管结石病例确认（n=60例）

胆汁和胆结石标本

胆道微生态与原发性胆总管结石成因和复发的关系研究技术路线图

门水平、纲水平、目水平、属水平进行胆道菌群的组成分析

微生物培养、鉴定及相关试验

胆汁耐受试验