实验步骤
2016-04-24 13:52:35 12 举报
实验步骤:首先,准备所需材料和设备。然后,按照实验要求设置实验环境,包括温度、湿度等参数的控制。接下来,进行样品的准备和处理,确保样品的纯度和质量符合实验要求。随后,根据实验设计,逐步加入试剂或操作样品,注意操作的准确性和安全性。在实验过程中,及时记录实验数据和观察结果,并进行数据的整理和分析。最后,根据实验结果得出结论,并对实验过程进行总结和评估。
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大纲/内容
每个芯片孔中加入100μl的封闭液,室温摇床上30分钟进行封闭
将1.4ml封闭液加入荧光剂-链霉亲和素的试管中,离心;每个孔中个加入80μl试管中液体,用密封条贴住玻片,铝箔纸包住后室温避光孵育1小时;后清洗,步骤同上
制备样品标准液
将1.4ml封闭液加入生物素标记抗体的小管中,离心后向芯片每个孔中加入80μl生物素标记抗体,室温放置1-2小时;清洗,步骤同上
制备生物素标记抗体
解冻待测样品,取100μl血清,加入封闭液至500μl,充分混合溶液并标记为标准管1
清洗
取出玻片芯片,将芯片及包装室温放置20-30分钟;打开包装袋,将芯片在真空干燥器或者室温干燥1-2小时
荧光标记
抽取所有孔中的样品,每孔中加入150μl 1倍浓度的洗液I,室温下清洗5次,每次清洗后将洗液完全清除(20倍浓度洗液I由去离子水稀释)
抽去封闭液,每个孔中加入100μl样品,室温环境下孵育1-2小时
干燥玻片
抽取所有孔中的洗液I,每孔中加入150μl 1倍浓度的洗液II,室温下清洗5次,每次清洗后将洗液完全清除(20倍浓度洗液II由去离子水稀释)
标记其他6个洁净离心管为标准管2至标准管7,每管中加入200μl封闭液
取标准管1中100μl溶液加入标准管2,充分混合后取标准管2中100μl溶液加入标准管3,依此类推至标准管7;另取一离心管加入100μl封闭液,标记为空白对照管
封闭和孵育
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