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构建精准免疫细胞治疗平台-TCRT
2021-03-15 16:51:14
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构建精准免疫细胞治疗平台
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大纲/内容
逆转录病毒感染
符合标准患者入组
LDH实验
蛋白层面
确认表达TCR受体的T细胞可识别特异性蛋白
明确特异性TCR-T对癌症患者的肿瘤细胞的杀伤作用
体内实验：构建肿瘤模型小鼠，检测特异性TCR-T杀伤功能
构建精准免疫细胞治疗平台
负载突变肽段的DC
FCM
TCR-T体系建立并开展临床研究
Western blot检测
转染突变RNA的DC
免疫细胞制备工艺以及临床研究经验
疗效及安全性评估
筛选并建立多癌种特异性抗原库
患者筛选
筛选识别癌中特异表达蛋白的TCR受体
TCR-T细胞构建
基因层面
单细胞克隆稀释法
TCR-T细胞回输
T细胞分选/激活
特异抗原靶点
Western blot验证表达
构建逆转录病毒MSCG-1载体
突变TCR恒定区
特异的TCR可变区
Q-PCR验证表达
CFSE/PI实验
体外实验：TCR-T细胞与靶细胞共培养，检测对靶细胞的杀伤力
免疫组化检测
与癌组织中的CD4+及CD8+T细胞共培养
TCR受体测序
TCR-T扩增培养
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