实验流程图1
2021-11-26 18:28:42 15 举报
哈哈哈
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大纲/内容
ELLSA法检测上清液VEGF、ANG-2蛋白表达水平
实验组:FSCN1过表达载体Lv-FSCN1
结论: 1、FSCN1在肾透明细胞癌组织中高表达，并在其增殖、侵袭、血管生成中发挥作用 2、FSCN1在肾透明细胞癌中的作用途径可能与激活VEGF/MAPK信号通路有关
Western blot检测FSCN1、MAPK、RAS、MEK、ERK、VEGF、VEGF-1、VEGF-2、ANG-2蛋白表达水平
Transwell实验检测侵袭能力
FSCN1沉默细胞株
VEGF信号通路
空白组:肾癌细胞株786-O、ACHN
RT-PCR检测FSCN1、MAPK、RAS、MEK、ERK、VEGF-1、VEGF-2、VEGF、ANG-2基因mRNA表达水平
实验组：肾癌细胞株786-O、ACHN
阴性对照组：Lv-NC
Western blot检测MAPK、RAS、MEK、ERK、VEGF、VEGF-1、VEGF-2、ANG-2蛋白表达水平
对照组：肾正常细胞株HK-2
慢病毒转染
RT-PCR检测FSCN1、MAPK、RAS、MEK、ERK、VEGF、VEGF-1、VEGF-2、ANG2基因mRNA表达水平
VEGF通路抑制剂AP2434(ponatinib)
实验组:FSCN1沉默表达载体shFSCN1
细胞水平：
阴性对照组：shNC1
MAPK信号通路
Matrigel胶管腔形成实验检测血管生成
EDU法、MTT法检测增殖能力
微血管生成
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