流程图
2024-11-26 15:19:35 13 举报质粒DNA的提取、定量、酶切与PCR鉴定
作者其他创作
大纲/内容
空柱离心1200rpm，2min
13000rpm，1min，弃上清
加入500μL去蛋白质PD
在洁净EP管中依次加入表格3内溶液
加600μL漂洗液PW
加入250μL溶液s2p2，温和颠倒6-8次混匀
轻轻混匀
取上清液700μL加到吸附柱中
1200rpm，2min
凝胶成像系统观察结果
用微量加样枪按顺序加入表格1内各试剂
将反应管放入PCR仪中进行反应循环
加入250μL溶液s1/p1，涡旋振荡悬浮沉淀
按照表格4上样
电泳
12000rpm，1min，弃滤液
加入350μL溶液s3p3，温和混匀
瞬时离心使反应液集中于管底
将吸附柱开盖，室温放置1min
吸附柱放入干净EP管，在吸附膜中间滴加50μL洗脱液EB，室温放置2min
进行紫外光吸收法定量检测
取1.5mL菌液
将质粒溶液收集到EP管中备用
12000rpm，10min
菌液离心，取上清液
37℃水浴1.5h
取出凝胶
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