未甲基化 C 的分子变化（单链）
加成反应：亚硫酸氢根（）攻击未甲基化 C 的 6 位碳原子，形成C - 亚硫酸氢盐加合物（胞嘧啶 - 6 - 磺酸盐），C 的环状结构暂时打开；
脱氨基反应：加合物的氨基（）被脱去，转化为尿嘧啶 - 6 - 磺酸盐（U - 亚硫酸氢盐加合物）—— 此为C→U 的中间修饰态，仍保留磺酸基团，未形成游离 U。
5mC/4mC 的分子变化
5mC
无任何反应，保持原始胞嘧啶结构（单链状态）；
4mC
与未甲基化 C 完全一致，形成U - 亚硫酸氢盐加合物（UBS-seq 特有，传统 BS-seq 仅 50% 转化）。
