DNA的合成
2024-12-09 19:23:41 0 举报
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DNA的合成
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大纲/内容
DNA复制的基本规律
半保留复制:复制时,亲代双链DNA解开为两股单链,各自作为模版(template)
原核生物:只有一个复制起点,会形成复制叉<br>真核生物:多起点双向复制,复制子:一个DNA复制起点起始的DNA复制区
半不连续复制<br>原因:DNA聚合酶只能催化5'到3'合成子链
前导链:沿着解链方向生成的子链是连续的<br>后随链:复制方向与解链方向相反,不连续<br>后随链为模版合成的新DNA片段叫做冈崎片段
高保真性:DNA聚合酶的严格配对、<br>复制叉、校对功能
DNA复制的酶学和拓扑学<br> 引物primer提供3'
DNA聚合酶(依赖DNA的DNA聚合酶DNA pol)<br>催化单个脱氧核苷酸之间的聚合
原核生物中有至少5种DNA聚合酶<br>pol1、2:修复功能,聚合功能低下<br>pol3:无修复作用,起到延伸的作用<br>pol3的组分:2个核心酶,一对β构成的滑动夹<br>与γ复合物(夹子加载复合体)连接,滑动夹在<br>复制延长时起到快速、夹稳的作用
常见的真核生物DNA聚合酶有5种<br>DNA polα合成引物
DNA聚合酶的碱基选择和<br>校对功能实现保真性
pol1的3'-5'外切酶活性:切除错配的碱基<br>5'-3'的活性:补回正确配对的碱基以及切除引物、突变的片段
DNA pol3的ε执行碱基选择功能
解链酶伴随DNA分子拓扑学变化
DnaA辨认复制起点<br>DnaB解开双链<br>DnaG催化RNA引物的生成<br>SSB单链结合蛋白稳定已解开的单链DNA
DNA拓扑异构酶改变DNA的超螺旋状态<br>1:切双链中的单链,不需要ATP<br>2:切掉双链,需要ATP
DNA连接酶连接复制中产生的单链缺口<br>消耗能量,只能连接DNA双链中的单链<br>缺口,是冈崎片段的连接靠DNA连接酶。
原核生物DNA复制过程
形成起始复合物
解链需要多种蛋白酶、拓扑异构酶的参与<br>引物是由引发酶催化合成的<br>起始复合物/引发体:DnaB、C、引发酶、DNA复制起始区域
复制叉结构的形成
后随链比前导链晚复制,但是由于其可以弯曲折叠<br>使得同一个DNA聚合酶3可以同时催化二者合成
终止:引物切除、连接切口
引物的水解、引物空隙的填补依靠DNA pol1<br>缺口由连接酶连接
真核生物DNA复制过程
复制起始于原核生物不同:有时序性不是同时激活而是分别激活,能否分裂取决于能否进入S期、M期<br>还需要解旋酶、拓扑异构酶、复制因子(RF,其中RFA起到稳定单链的作用,RFC起到除去polα的作用)、<br>增殖细胞核抗原(PCNA形成闭环的夹子)
延长过程发生DNA聚合酶的转换
polα催化合成引物之后被有连续合成能力的polE、δ替换<br>FEN1、RNaseH负责去除RNA引物
真核生物DNA合成后立刻组装成核小体
端粒酶参与解决染色体末端复制问题
端粒:染色体DNA末端DNA与结合蛋白质紧密结合<br>端粒酶:核糖核蛋白,有提供DNA模版和催化逆转录的功能,<br>是3'+单链序列(TG重复),端粒酶活性下降,个体老化<br>爬行模型:端粒酶通过该模型形成端粒DNA,也就是自我形成局部双链
每个细胞周期中DNA只在S期复制一次
复制基因的选择:G1,形成前复制复合物:复制起始识别复合物和CDC6<br>先后识别结合复制基因,随后招募复制因子、解旋酶装载形成。<br>复制基因的机会:S期,募集若干个复制基因结合蛋白和DNA聚合酶
线粒体按D环方式复制
需要合成引物,但是复制起点不在双链DNA同一位点,内外环之间有时序差别,<br>复制方向相反,重链(外面的)形成新的轻链,而旧的轻链保持单链形式就形成了D环
逆转录
逆转录酶:依赖RNA的DNA聚合酶,逆转录的步骤:RNA-DNA和RNA的杂化双链水解-DNA双链<br>
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