蛋白质化学

蛋白质化学

氨基酸的性质

物理性质

解离性质：等电点

中性：pl=(pk1+pk2)/2

酸性：pl=(pk1+pkR)/2

碱性：pl=(pk2+pkR)/2

熔点

溶解度

味感

光谱性质

Trp、Tyr、Phe

化学性质

α-氨基参与的反应

与甲醛发生羟基化反应

与亚硝酸反应

酰化反应

烷基化反应

生成西佛碱的反应

脱氨基和转氨基反应

α-羧基参与的反应

成盐反应

形成脂的反应

形成酰卤的反应

叠氮化反应

脱羧反应

α氨基和羧基共同参加的反应

与茚三酮反应

成肽反应

侧链基团的化学性质

巯基、羟基、咪唑基、甲硫基、胍基、芳香环

蛋白质的性质和分离纯化

蛋白质的性质

胶体性质

蛋白质变性作用

蛋白质的沉淀反应

蛋白质的两性电离及等电点

蛋白质的分离和纯化

沉淀法

依据分子量大小不同、表面所带电荷不同、表面的疏水和亲水区域不同

盐析法

有机溶剂沉淀法

等电点沉淀法

膜分离法

透析法：依据半透膜两侧的物质浓度差

层析法

离子交换层析法:依据所带电荷不同

凝胶过滤法：依据分子量不同

亲和层析法

离心沉降法

与蛋白质颗粒大小、密度、分子形状和转速有关

电泳法

依据分子量和电荷不同

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法

等电聚焦法

双向电泳法

一级结构的测定

N-末端氨基酸测定

DNFB法

丹磺酰氯（DNS）法

Edman法

C-末端氨基酸测定

肼解法

羧肽酶法

肽链的选择性降解

化学法

CNBr水解法

酶解法

胰蛋白酶

胰凝乳蛋白酶

胃蛋白酶

基本知识

20种氨基酸

1、丙氨酸 Ala  2、精氨酸 Arg  3、天冬氨酸 Asp  4、半胱氨酸 Cys 5、谷氨酰胺 Gln  6、谷氨酸 Glu   7、组氨酸 His  8、异亮氨酸 Ile9、甘氨酸 Gly  10、天冬酰胺 Asn  11、亮氨酸 Leu  12、赖氨酸 Lys13、甲硫氨酸 Met  14、苯丙氨酸 Phe  15、脯氨酸 Pro  16、丝氨酸 Ser17、苏氨酸 Thr  18、色氨酸 Trp  19、酪氨酸 Tyr  20、缬氨酸 Val

蛋白质含氮量计算

凯氏定氮法：N的含量平均为16%

蛋白质的结构

肽键

结构式:-CO-NH-

肽链方向

N端到C端

多肽链的反应

多肽链的水解

氨基酸的邻基反应

多肽主链的消旋化

颜色反应

一级结构

空间构象的基础

作用力：肽键、二硫键

二级结构

α-螺旋、β-折叠、β-转角、无规则卷曲

主要作用力：氢键

三级结构

侧链基团相互作用

主要作用力：次级键

四级结构

亚基聚合而成

主要作用力：疏水键

蛋白质分类

根据形状

球状

血红蛋白、免疫球蛋白等

纤维状

角蛋白、丝蛋白等

根据蛋白质组成

简单蛋白

清蛋白、球蛋白等

结合蛋白

色蛋白、糖蛋白等